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目的 构建靶向黏着酶(FAK)基因的miRNA真核表达质粒,为其在胃癌相关研究中的应用奠定基础.方法 设计合成两条针对FAK基因的特异性miRNA干扰序列,定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,经鉴定后转染胃癌BGC-823细胞,实时定量PCR及Western-blot技术鉴定重组体对细胞FAK基因表达的干扰效果.结果 针对FAK基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,转染BGC-823细胞后,细胞FAK mRNA及FAK蛋白表达均明显降低.结论 针对FAK基因的miRNA真核表达质粒成功构建,该质粒可用于miRNA进行靶向FAK的相关研究.

作者:刘启胜;董卫国;于红刚

来源:山东医药 2010 年 50卷 7期

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作者:
刘启胜;董卫国;于红刚
来源:
山东医药 2010 年 50卷 7期
标签:
FAK基因 微小RNA RNA干扰
目的 构建靶向黏着酶(FAK)基因的miRNA真核表达质粒,为其在胃癌相关研究中的应用奠定基础.方法 设计合成两条针对FAK基因的特异性miRNA干扰序列,定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,经鉴定后转染胃癌BGC-823细胞,实时定量PCR及Western-blot技术鉴定重组体对细胞FAK基因表达的干扰效果.结果 针对FAK基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,转染BGC-823细胞后,细胞FAK mRNA及FAK蛋白表达均明显降低.结论 针对FAK基因的miRNA真核表达质粒成功构建,该质粒可用于miRNA进行靶向FAK的相关研究.