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目的 构建p3×flag-myc-CMV- 24-HPV16E6真核表达载体,转染Caski细胞,检测其在Caski细胞中的表达.方法用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带HindⅢ、XbalⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到真核表达载体p3×flag-myc-CMV-24上,通过脂质体将p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6转染入Caski细胞.结果构建的p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6的真核表达载体转染Caski细胞48 h后经Western-blot可检测到融合蛋白高表达.结论成功构建了p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6真核表达载体;为进一步研究HPV16E6导致子宫颈癌病变的机制奠定了基础.

作者:王青元;朱靖;范少君;周颖;冯定庆;李彩荣;朱园园;肖卫华;凌斌

来源:山东医药 2010 年 50卷 39期

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作者:
王青元;朱靖;范少君;周颖;冯定庆;李彩荣;朱园园;肖卫华;凌斌
来源:
山东医药 2010 年 50卷 39期
标签:
宫颈癌 Caski细胞 人乳头瘤病毒16E6 3×flag
目的 构建p3×flag-myc-CMV- 24-HPV16E6真核表达载体,转染Caski细胞,检测其在Caski细胞中的表达.方法用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带HindⅢ、XbalⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到真核表达载体p3×flag-myc-CMV-24上,通过脂质体将p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6转染入Caski细胞.结果构建的p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6的真核表达载体转染Caski细胞48 h后经Western-blot可检测到融合蛋白高表达.结论成功构建了p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6真核表达载体;为进一步研究HPV16E6导致子宫颈癌病变的机制奠定了基础.