目的 构建结缔组织生长因子(CTGF)腺病毒载体并观察其对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响.方法 将CTGF基因整合入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CTGF,线性化后与pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得含目的基因的重组体质粒pAd-CTGF,酶切后用转染HEK293细胞包装成重组体腺病毒Ad-CTGF,扩增和纯化后PCR鉴定.应用Ad-CTGF感染VSMCs,划痕实验观察上调CTGF表达对VSMCs迁移的影响.结果 Ad-CTGF感染HEK293细胞后,随时间增加HEK293细胞表达绿色荧光的量也增加.PCR鉴定重组腺病毒Ad-CTGF电泳结果显示,1047 bp附近有一条带,与目的片段相符合,CTGF碱基序列经测序正确.Ad-CTGF感染VSMCs后CTGF高表达,创口愈合指数明显提高,VSMCs迁移受到明显提升.结论 成功构建了携带CTGF基因的重组腺病毒载体,上调CTGF表达可以明显增加VSMCs的迁移能力.
作者：霍晓川；罗俊生；孙霄云；关宁；张振兴；郭闻师
来源：山东医药 2012 年 52卷 4期
