目的 体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)并以腺病毒介导转染表达血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)2型受体(AT2R)。
方法 取大鼠主动脉血管,以常规组织块贴壁法培养VSMC;用同源重组方法构建带AT2R基因的复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-AT2R),并加以鉴定、扩增,以制取高滴度AdCMV-AT2R转染液,体外转染VSMC;用RT-PCR方法检测AT2R mRNA表达,免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测AT2R蛋白表达,流式细胞仪检测AT2R表达率,同时检测AT1R的表达变化。
结果 构建的AdCMV-AT2R体外转染培养VSMC表达率为89.51
作者:刘建平;何国祥;景涛;史光鉴;陈渝;张小荣
来源:高血压杂志 2001 年 9卷 1期