目的 采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Notch1基因的表达,观察阻断Notch信号通路对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用及其机制.方法 构建mNotch-1短发夹状RNA(mNotch-1 shRNA),利用MTT增殖试验分析mNotch-1 shRNA转染前及转染24、48、72 h时MG63细胞的增殖情况；通过Annexin V法染色和流式细胞术检测细胞凋亡率及与mNotch-1 shRNA作用时间的关系；Western blot检测细胞中Notch1、Bcl-2及Bax蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞增殖水平明显下降.Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高.Western blot结果分析显示mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞中Notch1基因表达明显降低,并且显著抑制Bcl-2基因和上调Bax基因的表达.结论 RNAi沉默Notch1基因能明显抑制人MG63细胞增殖,促进细胞凋亡；其作用机制可能与调控Bcl-2及Bax蛋白表达有关.
作者：吴德明；杨志强；刘翔；江川；戴闽
来源：山东医药 2013 年 53卷 4期
