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目的:观察白藜芦醇( RES)对胃癌SGC7901细胞自噬的影响,探讨Ⅲ型PI3 K激酶在其中的作用。方法不同浓度(0、10、20、50、75、100μmol/L) RES作用SGC7901细胞24 h,或Ⅲ型PI3K特异性抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、渥曼青霉素(WM)及自噬晚期抑制剂氯喹(CQ)预处理细胞1 h后加入不同浓度RES再作用24 h;采用Western blot法观察自噬特异性蛋白LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转化的情况,甲丹磺酰尸胺染色( MDC)观察自噬囊泡。结果不同浓度RES均可引起LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,且随浓度增加转化越明显;CQ预处理1 h后RES继续处理24 h,细胞内LC3蛋白转化、自噬酸性囊泡进一步增加;Ⅲ型PI3K特异性抑制剂3-MA(WM)不改变RES引起的LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,不抑制MDC阳性细胞增加、细胞内酸性囊泡的聚集。结论 RES可增强胃癌SGC7901细胞内自噬水平,而非自噬降解功能削弱导致,该作用不依赖于Ⅲ型PI3K。

作者:才明洁;庞晓阳;朱丹;董莹玥

来源:山东医药 2014 年 32期

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作者:
才明洁;庞晓阳;朱丹;董莹玥
来源:
山东医药 2014 年 32期
标签:
白藜芦醇 胃肿瘤 自噬 Ⅲ型PI3K 胃癌细胞 resveratrol stomach cancer autophagy class ⅢPI3K gastric cancer cell lines
目的:观察白藜芦醇( RES)对胃癌SGC7901细胞自噬的影响,探讨Ⅲ型PI3 K激酶在其中的作用。方法不同浓度(0、10、20、50、75、100μmol/L) RES作用SGC7901细胞24 h,或Ⅲ型PI3K特异性抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、渥曼青霉素(WM)及自噬晚期抑制剂氯喹(CQ)预处理细胞1 h后加入不同浓度RES再作用24 h;采用Western blot法观察自噬特异性蛋白LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转化的情况,甲丹磺酰尸胺染色( MDC)观察自噬囊泡。结果不同浓度RES均可引起LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,且随浓度增加转化越明显;CQ预处理1 h后RES继续处理24 h,细胞内LC3蛋白转化、自噬酸性囊泡进一步增加;Ⅲ型PI3K特异性抑制剂3-MA(WM)不改变RES引起的LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,不抑制MDC阳性细胞增加、细胞内酸性囊泡的聚集。结论 RES可增强胃癌SGC7901细胞内自噬水平,而非自噬降解功能削弱导致,该作用不依赖于Ⅲ型PI3K。