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目的:观察沉默胎盘生长因子( PGF)基因对脂多糖( LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞( HUVECs)炎性因子表达的影响。方法体外培养HUVECs细胞至第3代,分为A、B、C、D、E组。 A组转染siRNA-NC质粒(为非特异性沉默对照质粒),B组转染siRNA-PGF质粒,C组转染siRNA-NC+pcDNA3质粒(为NF-κB过表达对照质粒), D组转染siRNA-PGF+pcDNA3质粒, E组转染 siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB质粒。上述各组转染24 h后与100 ng/mL的LPS共孵育24 h,收集各组细胞及细胞上清液,分别用于相关细胞因子mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白( ELISA法)的检测。结果与A组相比,B组MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白的表达均明显下降,两组相比,P均<0.05。与D组相比,E组MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA和蛋白的表达均上升,两组相比,P均<0.05。结论沉默PGF基因可以通过NF-κB信号通路的介导在mRNA和蛋白水平上抑制HUVECs炎症因子MCP-1、IL-1、TNF-α的表达,从而减轻炎症反应。

作者:李海芳;苏卫东;刘传丽;徐晨;邱丽君

来源:山东医药 2015 年 43期

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作者:
李海芳;苏卫东;刘传丽;徐晨;邱丽君
来源:
山东医药 2015 年 43期
标签:
胎盘生长因子 基因沿默 脂多糖 动脉粥样硬化 人脐静脉内皮细胞 炎性因子
目的:观察沉默胎盘生长因子( PGF)基因对脂多糖( LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞( HUVECs)炎性因子表达的影响。方法体外培养HUVECs细胞至第3代,分为A、B、C、D、E组。 A组转染siRNA-NC质粒(为非特异性沉默对照质粒),B组转染siRNA-PGF质粒,C组转染siRNA-NC+pcDNA3质粒(为NF-κB过表达对照质粒), D组转染siRNA-PGF+pcDNA3质粒, E组转染 siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB质粒。上述各组转染24 h后与100 ng/mL的LPS共孵育24 h,收集各组细胞及细胞上清液,分别用于相关细胞因子mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白( ELISA法)的检测。结果与A组相比,B组MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白的表达均明显下降,两组相比,P均<0.05。与D组相比,E组MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA和蛋白的表达均上升,两组相比,P均<0.05。结论沉默PGF基因可以通过NF-κB信号通路的介导在mRNA和蛋白水平上抑制HUVECs炎症因子MCP-1、IL-1、TNF-α的表达,从而减轻炎症反应。