目的：制备包载髓样细胞白血病1（Mcl-1）基因的小干扰RNA（siRNA）囊泡（Mcl-1基因siRNA囊泡），并观察其对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用。方法①Mcl-1基因siRNA囊泡制备及其功能鉴定：采用乙醇注入法制备空白囊泡，将其分别和FAM标记（荧光标记物，可在显微镜下被观察）的正常siRNA（FAM-siRNA）、Mcl-1基因siRNA溶液涡旋、静电复合，室温静置30 min，获得包载FAM-siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA囊泡。采用马尔文激光粒度仪测定空白囊泡、包载FAM-siRNA囊泡的平均粒径和zeta电位；采用超滤离心－荧光分光光度法测定包载FAM-siRNA囊泡的荧光强度并计算包封率；观察FAM-siRNA释放情况，计算FAM- siRNA释放率。取HepG2细胞分为A、B、C、D 组，培养24 h 时 C 组加入包载 FAM- siRNA 囊泡，D 组加入包载 FAM-siRNA 囊泡和 Lipo-fectamin转染试剂，B组加入游离FAM-siRNA，A组不做任何处理，继续培养6 h时观察各组细胞FAM- siRNA摄取情况。②转染Mcl-1基因siRNA囊泡对HepG2细胞的生长抑制作用观察：取HepG2细胞，分为1、2、3、4、5组，5×105／孔接种于6孔板，每组3个复孔。培养24 h时1、2、3、4组分别加入游离Mcl-1 siRNA、包载FAM- siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA ＋Lipofectamin转染试剂，5

作者：王绍军；郭思彤；吴闯；赵赶

来源：山东医药 2016 年 56卷 39期