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目的 观察羟基磷灰石(HAP)对人肾小管上皮细胞株HK-2细胞骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨HAP在肾结石形成中的作用机制.方法 体外培养HK-2细胞,分为正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组及HAP4组.正常对照组在正常培养液中培养,HAP1~4组分别在正常培养液中加入200、400、600、800 ng/mL的HAP悬液.各组培养至12、24、48、72 h时,采用CCK-8法检测细胞活力.培养至24 h时,采用RT-qPCR法检测各组细胞中OPN mRNA的表达,采用Western blot法检测各组细胞中OPN蛋白的表达.结果 随着HAP浓度增加,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP的浓度呈负相关(r=-0.566 3,P<0.01).随着HAP作用时间延长,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP作用时间呈负相关(r=-0.796 3,P<0.01).正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN mRNA相对表达量分别为1.151±0.029、1.201±0.004、1.269±0.029、1.179±0.022、1.406±0.058,HAP2组、HAP4组OPN mRNA相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05).正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN蛋白相对表达量分别为0.418±0.010、0.436±0.016、0.512±0.021、0.562±0.016、0.627±0.023,HAP2、HAP3、HAP4组OPN蛋白相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05).结论 HAP可使人肾小管上皮细胞出

作者:余骏川;邓耀良;黎承杨;陶芝伟;关晓峰;吴基华;宁鑫;刘云龙;何子奇;刘权

来源:山东医药 2017 年 57卷 14期

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余骏川;邓耀良;黎承杨;陶芝伟;关晓峰;吴基华;宁鑫;刘云龙;何子奇;刘权
来源:
山东医药 2017 年 57卷 14期
标签:
羟基磷灰石 骨桥蛋白 肾结石 肾小管上皮细胞 细胞损伤 肾钙化斑 hydroxyapatite osteopontin kidney calculi renal tubular epithelial cells cell damage renal calcification
目的 观察羟基磷灰石(HAP)对人肾小管上皮细胞株HK-2细胞骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨HAP在肾结石形成中的作用机制.方法 体外培养HK-2细胞,分为正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组及HAP4组.正常对照组在正常培养液中培养,HAP1~4组分别在正常培养液中加入200、400、600、800 ng/mL的HAP悬液.各组培养至12、24、48、72 h时,采用CCK-8法检测细胞活力.培养至24 h时,采用RT-qPCR法检测各组细胞中OPN mRNA的表达,采用Western blot法检测各组细胞中OPN蛋白的表达.结果 随着HAP浓度增加,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP的浓度呈负相关(r=-0.566 3,P<0.01).随着HAP作用时间延长,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP作用时间呈负相关(r=-0.796 3,P<0.01).正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN mRNA相对表达量分别为1.151±0.029、1.201±0.004、1.269±0.029、1.179±0.022、1.406±0.058,HAP2组、HAP4组OPN mRNA相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05).正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN蛋白相对表达量分别为0.418±0.010、0.436±0.016、0.512±0.021、0.562±0.016、0.627±0.023,HAP2、HAP3、HAP4组OPN蛋白相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05).结论 HAP可使人肾小管上皮细胞出