目的 观察γ-分泌酶抑制剂(GSIs)DAPT对结肠癌细胞株HT-29增殖及结直肠癌肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)、Notch信号通路受体Notch4、Notch信号通路配体DLL1表达的影响.方法 体外培养HT-29细胞,取对数生长期细胞用于实验.分别以0、5、10、20、40、80 μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24、48、72 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,用MTT比色法检测细胞增殖能力(以OD值表示).分别以0、20、40 μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24 h后,采用RT-PCR法检测细胞中的ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA,分别采用Western blotting法和免疫组化法检测ALDH1、Notch4、DLL1蛋白.分析HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA及蛋白表达的相关性.结果 DAPT对HT-29细胞的增殖抑制作用呈一定剂量、时间依赖性,40、80 μmol/L浓度组培养48、72 h时细胞增殖能力低于培养24 h时(P均<0.05).DAPT处理后的细胞形态出现典型凋亡状态改变.20、40 μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA相对表达量低于0 μmol/L组(P均<0.05).0、20、40 μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白相对表达量依次降低(P均<0.05).免疫组化染色图像分析结果示,0、20、40 μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白表达OD值

作者：赵小芳；王红

来源：山东医药 2017 年 57卷 15期