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目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对髓样相关蛋白8(MRP8)/髓样相关蛋白14(MRP14)诱导小鼠胚胎成纤维细胞凋亡的影响.方法 制备MRP8、MRP14、MRP8/14备用.分别取p38+/+和p38-/-细胞,随机分为空白对照组、MRP8组、MRP14组、MRP8/14组.MRP8组、MRP14组、MRP8/14组分别加入50 μg/mL MRP8、MRP14和MRP8/14.空白对照组加入等体积的DMEM培养液.各组干预24、48 h,采用MTT法检测p38+/+和p38-/-细胞活力.采用流式细胞术检测空白对照组及MRP8/14干预24、48 h组p38+/+和p38-/-细胞凋亡率.采用MTT法检测空白对照组、MRP8/14组以及TLR4受体抑制剂TAK242或RAGE中和抗体处理的MRP8/14(分别设为MRP8/14+TAK242组、MRP8/14+RAGE组)干预24 h p38+/+细胞活力.采用MTT法和流式细胞术检测空白对照组、MRP8/14组以及p38激酶抑制剂SB203580处理的MRP8/14(设为MRP8/14+SB203580组)干预24 h p38+/+细胞活力和凋亡率.采用Western blotting法检测MRP8/14干预0、1、2、4、6、8 h p38+/+细胞p38 MAPK磷酸化.结果 MRP8组、MRP14组、MRP8/14组干预24、48 h p38+/+、p38-/-细胞活力均低于空白对照组(P均<0.05),但无论MRP8/14组干预24 h还是48 h,p38-/-细胞活力明显高于p38+/+细胞(P均<0.05).MRP8/14干预24、48 h组p38+/+细胞凋亡

作者:王娟;陈小欢;李磊;卢夏英;姜勇

来源:山东医药 2017 年 57卷 28期

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王娟;陈小欢;李磊;卢夏英;姜勇
来源:
山东医药 2017 年 57卷 28期
标签:
胚胎成纤维细胞 髓样相关蛋白8 髓样相关蛋白14 p38丝裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡 小鼠 embryo fibroblasts myeloid-related protein 8 myeloid-related protein 14 p38 mitogen-activated protein kinase apoptosis mouse
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对髓样相关蛋白8(MRP8)/髓样相关蛋白14(MRP14)诱导小鼠胚胎成纤维细胞凋亡的影响.方法 制备MRP8、MRP14、MRP8/14备用.分别取p38+/+和p38-/-细胞,随机分为空白对照组、MRP8组、MRP14组、MRP8/14组.MRP8组、MRP14组、MRP8/14组分别加入50 μg/mL MRP8、MRP14和MRP8/14.空白对照组加入等体积的DMEM培养液.各组干预24、48 h,采用MTT法检测p38+/+和p38-/-细胞活力.采用流式细胞术检测空白对照组及MRP8/14干预24、48 h组p38+/+和p38-/-细胞凋亡率.采用MTT法检测空白对照组、MRP8/14组以及TLR4受体抑制剂TAK242或RAGE中和抗体处理的MRP8/14(分别设为MRP8/14+TAK242组、MRP8/14+RAGE组)干预24 h p38+/+细胞活力.采用MTT法和流式细胞术检测空白对照组、MRP8/14组以及p38激酶抑制剂SB203580处理的MRP8/14(设为MRP8/14+SB203580组)干预24 h p38+/+细胞活力和凋亡率.采用Western blotting法检测MRP8/14干预0、1、2、4、6、8 h p38+/+细胞p38 MAPK磷酸化.结果 MRP8组、MRP14组、MRP8/14组干预24、48 h p38+/+、p38-/-细胞活力均低于空白对照组(P均<0.05),但无论MRP8/14组干预24 h还是48 h,p38-/-细胞活力明显高于p38+/+细胞(P均<0.05).MRP8/14干预24、48 h组p38+/+细胞凋亡