目的 研究人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中α3神经型尼古丁受体(nAChR)对细胞凋亡及凋亡相关信号通路p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的影响,了解α3 nAChR在老年性痴呆发病中的作用机制.方法 将细胞分为稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒组、空质粒组及正常对照组,用real-time PCR和Western blot法检测α3 nAChR mRNA水平和蛋白水平的表达,以评价RNA的干扰效率；real-time PCR方法检测凋亡相关蛋白bax及bcl-2 mRNA水平.将3组细胞用10 μmoL/Lβ淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)处理48 h,进一步用流式细胞术检测细胞凋亡率；用Western blot迹方法检测细胞中p-p38及p38蛋白表达水平的变化.将3组细胞用p38通路阻断剂阻断信号转导后再用Aβ25-35处理,测定细胞凋亡率.结果 稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒的细胞克隆株,α3 nAChR mRNA及蛋白表达水平分别降低了95％和86％；与空质粒和正常对照组相比,凋亡相关蛋白bax mRNA水平增加2.11倍(P＜0.01),bcl-2 mRNA水平下降0.53倍(P＜0.01),凋亡率未发生变化(3.40％±0.20％),但能增加Aβ诱导的细胞凋亡(24.52％±1.59％)；与Aβ处理SH-SY5Y细胞组相比,Aβ引起α3 nAChR沉默细胞p-p38蛋白表达水平增加178％ (P ＜0.01)；在加入p38特异性阻断剂后加入Aβ,与未加阻断剂时相比,3组

作者：张雪玲；齐晓岚；任家谋；吴昌学；官志忠

来源：中华病理学杂志 2013 年 42卷 2期