目的 探讨Fascin-1对恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人恶性黑色素瘤细胞A375和人皮肤成纤维细胞CCC-HSF-1.将A375细胞随机分为CON组和Fascin-1-shRNA组,分别按照10 MOI的感染复数加入CON和Fascin-1-shRNA病毒,培养48 h.采用qRT-PCR法及Western blotting法检测常规培养的CCC-HSF-1、A375细胞以及CON组、Fascin-1-shRNA组Fascin-1 mRNA和蛋白表达.分别采用Dye67染色法、Annexin V/PI染色法检测CON组、Fascin-1-shRNA组细胞增殖指数及凋亡率,采用Western blotting法检测Bcl-2、Bax、Bad蛋白表达.结果 常规培养的CCC-HSF-1、A375细胞中Fascin-1 mRNA相对表达量分别为0.21±0.015、1.00±0.01,Fascin-1蛋白相对表达量分别为0.12±0.04、0.75±0.11,二者比较P均<0.01.CON组、Fascin-1-shRNA组Fascin-1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.01 、0.19±0.04,Fascin-1蛋白相对表达量分别为1.28±0.17、0.24±0.10,两组比较P均<0.01.Fascin-1-shRNA组培养3、4天时细胞增殖指数均低于CON组同期(P均<0.05).Fascin-1-shRNA组细胞凋亡率高于CON组(P<0.01).Fascin-1-shRNA组Bcl-2蛋白相对表达量低于CON组,Bax、Bad蛋白相对表达量高于CON组(P均<0.01).结论 Fascin-1表达下调可抑制恶性黑色素瘤细
作者:骆曼;李灵毅
来源:山东医药 2017 年 57卷 28期