目的 探讨POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制.方法 将体外培养的人源骨肉瘤细胞系U2-OS、143B随机分为Lv-HELQ组、NC组、Lv-shHELQ组,分别转染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-shHELQ慢病毒载体.转染48 h时,采用Western blotting法检测HELQ蛋白表达,结果显示两种细胞Lv-HELQ组HELQ蛋白相对表达量均高于NC组,Lv-shHELQ组均低于NC组,组间比较P均<0.05,提示HELQ转染成功.三组(两种细胞)转染48 h时,采用CCK8法检测细胞增殖情况(光密度值),采用Wound healing法检测细胞迁移率,采用Transwell invasion法检测细胞穿膜细胞数(侵袭能力),采用彗星实验检测彗星尾部DNA百分比.结果 两种细胞Lv-HELQ组光密度值均高于NC组,Lv-shHELQ组光密度值均低于NC组,组间比较P<0.05或<0.01.两种细胞Lv-HELQ组细胞迁移率、穿膜细胞数及均彗星尾部DNA百分比均低于NC组,Lv-shHELQ组均高于NC组,组间比较P均<0.05.结论 HELQ可抑制人骨肉瘤细胞增殖、侵袭、转移,修复DNA损伤可能是其作用机制.
作者:钟俊桥;周云飞;刘家明;刘东宁;周扬;刘志礼
来源:山东医药 2017 年 57卷 48期