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目的 观察糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白(AGE-LDL)对人主动脉瓣膜间质细胞(HAVICs)钙化和炎症反应的诱导作用,并探讨其机制.方法 非CAVD瓣膜组织(non-CAVD组)取自手术治疗的主动脉瓣脱垂患者,CAVD瓣膜组织(CAVD组)取自因钙化性主动脉瓣狭窄而进行主动脉瓣膜置换术的患者.采用免疫组化法检测non-CAVD组和CAVD组中的AGE.取non-CAVD组的主动脉瓣膜组织,分离HAVICs,分为对照组、LDL组、AGE-HSA组和AGE-LDL组.对照组给予M199培养液,LDL组给予100μg/mL的LDL,AGE-HSA组给予100μg/mL的AGE-HSA,AGE-LDL组分别给予50、100、200μg/mL的AGE-LDL.取对照组和AGE-LDL组细胞培养21 d后进行茜红素染色,镜下观察细胞钙化情况.给药48 h后检测各组细胞中的细胞间黏附分子1(ICAM-1)、IL-6蛋白及细胞上清液中的IL-6、IL-8.用100μg/mL的AGE-LDL分别刺激HAVICs 0.5、1、2、4、8 h,以只加DMSO的细胞作为对照,检测HAVICs中NF-κB磷酸化水平.将HAVICs随机分为5个组,对照组给予M199培养液;LDL组给予100μg/mL的LDL;DMSO组给予含有1‰DMSO的M199培养液;AGE-LDL组给予100μg/mL的AGE-LDL;Bay11-7082组予2.5μmol/L的Bay11-7082干预30 min,然后给予100μg/mL的AGE-LDL;给药48 h后检测各组细胞中的ICAM、IL-6蛋白.结果 与对照组相比

作者:杨茜;马琼;曾庆春;吴观迪;郑韵仪;赖文岩;许顶立

来源:山东医药 2018 年 58卷 19期

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杨茜;马琼;曾庆春;吴观迪;郑韵仪;赖文岩;许顶立
来源:
山东医药 2018 年 58卷 19期
标签:
人主动脉瓣膜间质细胞 钙化性主动脉瓣疾病 糖基化终产物 低密度脂蛋白 细胞钙化 炎症反应 细胞间黏附分子1 白细胞介素6
目的 观察糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白(AGE-LDL)对人主动脉瓣膜间质细胞(HAVICs)钙化和炎症反应的诱导作用,并探讨其机制.方法 非CAVD瓣膜组织(non-CAVD组)取自手术治疗的主动脉瓣脱垂患者,CAVD瓣膜组织(CAVD组)取自因钙化性主动脉瓣狭窄而进行主动脉瓣膜置换术的患者.采用免疫组化法检测non-CAVD组和CAVD组中的AGE.取non-CAVD组的主动脉瓣膜组织,分离HAVICs,分为对照组、LDL组、AGE-HSA组和AGE-LDL组.对照组给予M199培养液,LDL组给予100μg/mL的LDL,AGE-HSA组给予100μg/mL的AGE-HSA,AGE-LDL组分别给予50、100、200μg/mL的AGE-LDL.取对照组和AGE-LDL组细胞培养21 d后进行茜红素染色,镜下观察细胞钙化情况.给药48 h后检测各组细胞中的细胞间黏附分子1(ICAM-1)、IL-6蛋白及细胞上清液中的IL-6、IL-8.用100μg/mL的AGE-LDL分别刺激HAVICs 0.5、1、2、4、8 h,以只加DMSO的细胞作为对照,检测HAVICs中NF-κB磷酸化水平.将HAVICs随机分为5个组,对照组给予M199培养液;LDL组给予100μg/mL的LDL;DMSO组给予含有1‰DMSO的M199培养液;AGE-LDL组给予100μg/mL的AGE-LDL;Bay11-7082组予2.5μmol/L的Bay11-7082干预30 min,然后给予100μg/mL的AGE-LDL;给药48 h后检测各组细胞中的ICAM、IL-6蛋白.结果 与对照组相比