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目的 探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制.方法 分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高.当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM.将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组.对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养.培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率.将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENaC)相对表达量.结果 无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01).对照组 α-ENaC相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05.结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可

作者:周祉妤;昌建鈞;候亚鹏;丁炎;聂宏光

来源:山东医药 2018 年 58卷 20期

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作者:
周祉妤;昌建鈞;候亚鹏;丁炎;聂宏光
来源:
山东医药 2018 年 58卷 20期
标签:
肺泡上皮细胞 肺泡Ⅱ型细胞 骨髓间充质干细胞条件培养基 钠通道 钠通道蛋白α 小鼠 alveolar epithelial cells alveolar type Ⅱcells bone marrow mesenchymal stem cells conditioned medi-um sodium channel sodium channel protein α mouse
目的 探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制.方法 分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高.当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM.将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组.对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养.培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率.将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENaC)相对表达量.结果 无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01).对照组 α-ENaC相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05.结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可