目的 探讨TNF-α对类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞RUNX3表达的影响及意义.方法 从类风湿性关节炎患者滑膜组织中分离并培养原代成纤维细胞,加入不同浓度(0、0.1、1、10、50 ng/mL)TNF-α分别作用0、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR法检测RUNX3 mRNA相对表达量.取传3～8代成纤维细胞,随机分为RUNX3过表达组和对照组,分别感染人源RUNX3腺病毒、绿色荧光蛋白(GFP)对照腺病毒,感染24 h两组均加入50 ng/mL TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测两组炎性因子[IL-6、前列腺素E2(PGE-2)、趋化因子CXC基序配体9(CXCL-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-13]表达,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.取传3～8代成纤维细胞,随机分为RUNX3沉默组和对照组,分别采用脂质体转染法转染siRUNX3、NC-control siRNA,转染24 h两组均加入50 ng/mL TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测IL-6、PGE-2、CXCL-9、MMP-2及MMP-13 mRNA表达.结果 成纤维细胞RUNX3 mRNA相对表达量随着TNF-α浓度升高及作用时间延长而逐渐升高,呈浓度和时间依懒性,以TNF-α浓度50 ng/mL、作用时间24 h时RUNX3 mRNA相对表达量上调最为显著(P均<0.05).RUNX3过表达组和对照组穿膜细胞数分别为(56±4)、(20±3)个,两组比较P<0.01.RUNX

作者：王春亮；王林；潘继红

来源：山东医药 2018 年 58卷 20期