目的 观察微小RNA-23b(miR-23b)转染对宫颈癌干细胞(CD133+CaSki细胞)顺铂(CDDP)化疗敏感性的影响,并探讨其机制.方法 流式细胞术分选宫颈癌细胞系CaSki中的CD133+CaSki细胞,荧光定量PCR检测CD133+CaSki细胞和宫颈癌非干细胞(CD133-CaSki细胞)中的miR-23b,并预测其靶基因.将CD133+CaSki细胞分为mimics组、NC组、空白对照组,mimics组转染miR-23b模拟物(miR-23b mimics),NC组转染miR-23b阴性对照物(miR-23b NC),空白对照组不做任何处理,之后分别加入不同浓度的CDDP,CCK-8法检测CDDP对各组CD133+CaSki细胞的半数抑制浓度(IC50).Western blotting法检测CD133+CaSki、CD133-CaSki、转染miR-23b mimics的CD133+CaSki细胞中乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)蛋白.将人胚胎肾细胞系HEK-293T分为wt组、mut组、空载体组,wt组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO-ALDH1A1-3′-UTR wt(野生型)荧光素酶质粒,mut组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO-ALDH1A1-3′-UTR mut(突变型)荧光素酶质粒,空载体组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO空载体质粒,采用双荧光素酶试验检测各组细胞中转染质粒编码蛋白的萤光强度.结果 CD133+CaSki、CD133-CaSki细胞中miR-23b的相对表达量分别为0.29±0.05、1.09±0.14,两

作者：凌芳；沈慧玲

来源：山东医药 2018 年 58卷 47期