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目的 观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制.方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白.对数生长期MGC80-3细胞分为A、B、C、D组,B及D组分别加入10μL脂质体Lipofectamine 2000+5μL siRNA-ACSS2转染,C组加入及A组分别加入50μL无血清纯RPMI1640培养基+5μL阴性对照(NC);A组、B组均培养72 h,C组培养48 h时加入5μg/mL的顺铂(DDP),D组转染48 h时加入5μg/mL的DDP.培养24 h时,CCK8法检测各组细胞增殖活力,培养48、72 h时流式细胞分析术测算各组细胞早晚期凋亡率,Western blotting法检测各组细胞ACSS2、p65、p-p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(Bcl-xL)、凋亡蛋白Bcl-2相关的X蛋白(Bax).结果 MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87及RGM-1细胞ACSS2蛋白相对表达量分别为0.80±0.03、0.62±0.04、0.60±0.04、0.72±0.05、0.41±0.04.与RGM-1细胞比较,MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87细胞ACSS2相对表达量升高(P均<0.01).A、B、C、D组细胞增殖活力分别为98.67% ±4.89%、92.67% ±7.86%、62.67% ±4.05%、34.67% ±7.61%,A组与B组相比无明显

作者:糜磊;武丹;陶清;周月鹏;陈德玉

来源:山东医药 2019 年 59卷 18期

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作者:
糜磊;武丹;陶清;周月鹏;陈德玉
来源:
山东医药 2019 年 59卷 18期
标签:
乙酰辅酶A合成酶2 核因子κB B淋巴细胞瘤-2蛋白 B细胞淋巴瘤-特大型蛋白 Bcl-2相关的X蛋白 胃癌 顺铂 化疗敏感性
目的 观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制.方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白.对数生长期MGC80-3细胞分为A、B、C、D组,B及D组分别加入10μL脂质体Lipofectamine 2000+5μL siRNA-ACSS2转染,C组加入及A组分别加入50μL无血清纯RPMI1640培养基+5μL阴性对照(NC);A组、B组均培养72 h,C组培养48 h时加入5μg/mL的顺铂(DDP),D组转染48 h时加入5μg/mL的DDP.培养24 h时,CCK8法检测各组细胞增殖活力,培养48、72 h时流式细胞分析术测算各组细胞早晚期凋亡率,Western blotting法检测各组细胞ACSS2、p65、p-p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(Bcl-xL)、凋亡蛋白Bcl-2相关的X蛋白(Bax).结果 MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87及RGM-1细胞ACSS2蛋白相对表达量分别为0.80±0.03、0.62±0.04、0.60±0.04、0.72±0.05、0.41±0.04.与RGM-1细胞比较,MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87细胞ACSS2相对表达量升高(P均<0.01).A、B、C、D组细胞增殖活力分别为98.67% ±4.89%、92.67% ±7.86%、62.67% ±4.05%、34.67% ±7.61%,A组与B组相比无明显