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目的 观察微小RNA-150(miR-150)在肺癌细胞中的表达变化,并探讨其对肺癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 常规培养肺癌细胞A549、人肺正常上皮细胞16HBE,qRT-PCR法检测细胞中的miR-150.将A549细胞随机分为抑表达组、促表达组和对照组,抑表达组、促表达组经脂质体分别转染miR-150抑制物、模拟物;转染48 h后,采用qRT-PCR法检测各组细胞中的miR-150验证转染效果,MTS法检测细胞增殖活力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞周期,qRT-PCR、Western blotting法分别检测细胞中的c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白.结果 A549细胞中miR-150相对表达量为10.21±0.06,高于16HBE细胞的1.00±0.10(P<0.05);miR-150相对表达量促表达组>对照组>抑表达组(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组细胞增殖OD490值下降,促表达组细胞增殖OD490值增高(P<0.05或<0.01);细胞克隆形成数目促表达组>对照组>抑表达组(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组G1期细胞比例增多,促表达组G2期细胞比例增多(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白相对表达量下降,促表达组c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白增加(P均<0.05).结论 肺癌A549细胞miR-150表达增加;miR-150可能通过上调c-Myc、Cyclin D1表达促进细胞周期的进程,

作者:张靖雯;孙亚娇;王东;陈复辉

来源:山东医药 2019 年 59卷 26期

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作者:
张靖雯;孙亚娇;王东;陈复辉
来源:
山东医药 2019 年 59卷 26期
标签:
肺癌 A549细胞 微小RNA-150 细胞增殖 细胞周期 细胞克隆 c-Myc蛋白 Cyclin D1蛋白
目的 观察微小RNA-150(miR-150)在肺癌细胞中的表达变化,并探讨其对肺癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 常规培养肺癌细胞A549、人肺正常上皮细胞16HBE,qRT-PCR法检测细胞中的miR-150.将A549细胞随机分为抑表达组、促表达组和对照组,抑表达组、促表达组经脂质体分别转染miR-150抑制物、模拟物;转染48 h后,采用qRT-PCR法检测各组细胞中的miR-150验证转染效果,MTS法检测细胞增殖活力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞周期,qRT-PCR、Western blotting法分别检测细胞中的c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白.结果 A549细胞中miR-150相对表达量为10.21±0.06,高于16HBE细胞的1.00±0.10(P<0.05);miR-150相对表达量促表达组>对照组>抑表达组(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组细胞增殖OD490值下降,促表达组细胞增殖OD490值增高(P<0.05或<0.01);细胞克隆形成数目促表达组>对照组>抑表达组(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组G1期细胞比例增多,促表达组G2期细胞比例增多(P均<0.05);与对照组比较,抑表达组c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白相对表达量下降,促表达组c-Myc、Cyclin D1 mRNA及蛋白增加(P均<0.05).结论 肺癌A549细胞miR-150表达增加;miR-150可能通过上调c-Myc、Cyclin D1表达促进细胞周期的进程,