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目的 探讨Hsp90抑制剂WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1增殖、凋亡及耐药基因表达的影响.方法 将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A、B、C组,A组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L WH-4,B组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L 17-AAG,C组加入等量生理盐水,培养48 h后,采用MTT法测算各组肝癌细胞SK-HEP-1增殖抑制率,并计算IC50.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A1、B1、C1组,分别加入2.3μmol/L WH-4、2.6μmol/L 17-AAG及生理盐水,培养48 h后,采用BrdU法观察肝癌细胞SK-HEP-1增殖活性.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A2、B2、C2组,分别加入2.25μmol/L WH-4、2.80μmol/L 17-AAG、生理盐水,培养48 h后,采用软琼脂平板实验检测肝癌细胞SK-HEP-1克隆形成率,流式细胞术检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡率,采用Western blotting法检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A3、B3、C3组,分别加入2.30μmol/L WH-4、2.65μmol/L 17-AAG及生理盐水.培养48 h后,采用qPCR法检测耐药基因ABCB1、ABCG2.结果 WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1有抑制作用,且呈浓度依赖性(R2=0.647(48h),P均<0.05),IC50为(2.35±0.25)μmol/L.与C1组相比,A1、B1组SK-HEP-1绿色荧光减弱.A2、B2组克隆形成率相比,P<0.05.与B2组比较,A2

作者:徐单单;王颖;陈素红

来源:山东医药 2019 年 59卷 33期

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徐单单;王颖;陈素红
来源:
山东医药 2019 年 59卷 33期
标签:
热休克蛋白90抑制剂 WH-4 肝癌 B淋巴细胞瘤-2基因 B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白 多药耐药基因 ABCB1 乳腺癌耐药蛋白
目的 探讨Hsp90抑制剂WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1增殖、凋亡及耐药基因表达的影响.方法 将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A、B、C组,A组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L WH-4,B组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L 17-AAG,C组加入等量生理盐水,培养48 h后,采用MTT法测算各组肝癌细胞SK-HEP-1增殖抑制率,并计算IC50.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A1、B1、C1组,分别加入2.3μmol/L WH-4、2.6μmol/L 17-AAG及生理盐水,培养48 h后,采用BrdU法观察肝癌细胞SK-HEP-1增殖活性.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A2、B2、C2组,分别加入2.25μmol/L WH-4、2.80μmol/L 17-AAG、生理盐水,培养48 h后,采用软琼脂平板实验检测肝癌细胞SK-HEP-1克隆形成率,流式细胞术检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡率,采用Western blotting法检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A3、B3、C3组,分别加入2.30μmol/L WH-4、2.65μmol/L 17-AAG及生理盐水.培养48 h后,采用qPCR法检测耐药基因ABCB1、ABCG2.结果 WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1有抑制作用,且呈浓度依赖性(R2=0.647(48h),P均<0.05),IC50为(2.35±0.25)μmol/L.与C1组相比,A1、B1组SK-HEP-1绿色荧光减弱.A2、B2组克隆形成率相比,P<0.05.与B2组比较,A2