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目的 探讨脾脏调节性树突状细胞(CD11c-CD45RBhigh DC)腹腔回输对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠视神经的保护作用及其机制.方法 无菌条件下制备小鼠脾脏DC,经抗CD45RB磁珠阳选获得CD45RBhigh DC,剪切掉细胞上的磁珠,再加入抗小鼠CD11c磁珠,MS磁性分离柱阴选部分即为CD11c-CD45RBhigh DC,经标染的抗CD11c单克隆抗体-别藻蓝蛋白和抗CD45RB单克隆抗体-藻红蛋白染色,上流式细胞仪鉴定.取C57BL/6小鼠50只适应性饲养7 d,随机分为对照组、模型组及低、中、高剂量组,每组10只.对照组常规饲养,不建模,模型组及低、中、高剂量组采用MOG35-55诱导EAE模型.低、中、高剂量组建模当日分别腹腔回输脾脏CD11c-CD45RBhigh DC 1×105、5×105、10×105个/只,对照组与模型组同期腹腔注射等量PBS.模型组及低、中、高剂量组建模当日开始,对照组同期,每日观察其神经功能并进行神经症状评分.模型组及低、中、高剂量组建模第1~3、7、15天,对照组同期,尾静脉取血,采用ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α、IL-4,采用流式细胞仪计数CD4+T细胞.各组末次尾静脉取血后,心脏灌注处死,自筛板后0.5 mm处取球后视神经组织,分别行HE染色和LFB染色,观察视神经组织病理学变化.结果 通过磁珠分选仪获取脾脏CD11c-CD45RBhigh DC,经流式细胞仪检测

作者:侯艳丽;杜然;刘庆阳;王艳玲

来源:山东医药 2020 年 60卷 22期

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作者:
侯艳丽;杜然;刘庆阳;王艳玲
来源:
山东医药 2020 年 60卷 22期
标签:
多发性硬化相关性视神经炎 实验性自身免疫性脑脊髓炎 调节性树突状细胞 炎症细胞因子 CD4+T细胞 小鼠
目的 探讨脾脏调节性树突状细胞(CD11c-CD45RBhigh DC)腹腔回输对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠视神经的保护作用及其机制.方法 无菌条件下制备小鼠脾脏DC,经抗CD45RB磁珠阳选获得CD45RBhigh DC,剪切掉细胞上的磁珠,再加入抗小鼠CD11c磁珠,MS磁性分离柱阴选部分即为CD11c-CD45RBhigh DC,经标染的抗CD11c单克隆抗体-别藻蓝蛋白和抗CD45RB单克隆抗体-藻红蛋白染色,上流式细胞仪鉴定.取C57BL/6小鼠50只适应性饲养7 d,随机分为对照组、模型组及低、中、高剂量组,每组10只.对照组常规饲养,不建模,模型组及低、中、高剂量组采用MOG35-55诱导EAE模型.低、中、高剂量组建模当日分别腹腔回输脾脏CD11c-CD45RBhigh DC 1×105、5×105、10×105个/只,对照组与模型组同期腹腔注射等量PBS.模型组及低、中、高剂量组建模当日开始,对照组同期,每日观察其神经功能并进行神经症状评分.模型组及低、中、高剂量组建模第1~3、7、15天,对照组同期,尾静脉取血,采用ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α、IL-4,采用流式细胞仪计数CD4+T细胞.各组末次尾静脉取血后,心脏灌注处死,自筛板后0.5 mm处取球后视神经组织,分别行HE染色和LFB染色,观察视神经组织病理学变化.结果 通过磁珠分选仪获取脾脏CD11c-CD45RBhigh DC,经流式细胞仪检测