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目的 观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82.采用RT-PCR法检测上述细胞中PIK3AP1 mRNA的表达.利用Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库,对肺癌组织中PIK3AP1 mRNA表达与患者预后的相关性进行分析.取不表达PIK3AP1的肺癌细胞,将其分为观察组和对照组,以慢病毒转染技术分别转染PIK3AP1过表达载体和空载体,采用BrdU法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测AKT、p-AKT蛋白表达.结果 PIK3AP1基因在小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82中高表达,在非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358中低表达或不表达,在正常支气管上皮细胞中不表达.PIK3AP1基因高表达和低表达肺癌患者的中位生存期分别为60.73、92.63个月,PIK3AP1基因高表达者预后较差(P<0.05).取不表达PIK3AP1的A549细胞进行转染,与对照组比较,观察组细胞增殖能力增高,侵袭能力增强(P均<0.01),迁移能力无明显变化(P>0.05);p-AKT蛋白表达增高(P<0.01),AKT蛋白表达无明显变化(P>0.05).结

作者:杜玮;黄秋敏;严飞

来源:山东医药 2020 年 60卷 26期

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杜玮;黄秋敏;严飞
来源:
山东医药 2020 年 60卷 26期
标签:
肺癌 PIK3AP1 p-AKT 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移
目的 观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82.采用RT-PCR法检测上述细胞中PIK3AP1 mRNA的表达.利用Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库,对肺癌组织中PIK3AP1 mRNA表达与患者预后的相关性进行分析.取不表达PIK3AP1的肺癌细胞,将其分为观察组和对照组,以慢病毒转染技术分别转染PIK3AP1过表达载体和空载体,采用BrdU法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测AKT、p-AKT蛋白表达.结果 PIK3AP1基因在小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82中高表达,在非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358中低表达或不表达,在正常支气管上皮细胞中不表达.PIK3AP1基因高表达和低表达肺癌患者的中位生存期分别为60.73、92.63个月,PIK3AP1基因高表达者预后较差(P<0.05).取不表达PIK3AP1的A549细胞进行转染,与对照组比较,观察组细胞增殖能力增高,侵袭能力增强(P均<0.01),迁移能力无明显变化(P>0.05);p-AKT蛋白表达增高(P<0.01),AKT蛋白表达无明显变化(P>0.05).结