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目的探讨慢性下肢动脉缺血的基因治疗. 方法选用血管内皮生长因子(VEGF)作为治疗基因,通过建立实验兔慢性下肢动脉缺血模型,将构建的人VEGF165cDNA真核表达载体phVEGF165注入缺血肌肉内,采用RT-PCR和原位杂交法测定肌肉内hVEGF165基因表达,采用免疫组化和Western印迹法测定其蛋白产物的表达.结果骨骼肌细胞外源性hVEGF165基因表达量于注射后1周达到高峰,持续2~3周.蛋白表达于注射后2周达到高峰,维持至注射后4周. 结论骨骼肌细胞能摄取并表达外源性hVEGF165基因,并能进一步合成分泌hVEG165蛋白.phVEGF165肌肉直接注射的作用时间有限、范围局限,使用安全性较高.

作者:赵意平;张柏根

来源:上海第二医科大学学报 2002 年 22卷 5期

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作者:
赵意平;张柏根
来源:
上海第二医科大学学报 2002 年 22卷 5期
标签:
血管内皮生长因子 重组质粒 原位转染 基因治疗 血管生成 动脉闭塞性疾病
目的探讨慢性下肢动脉缺血的基因治疗. 方法选用血管内皮生长因子(VEGF)作为治疗基因,通过建立实验兔慢性下肢动脉缺血模型,将构建的人VEGF165cDNA真核表达载体phVEGF165注入缺血肌肉内,采用RT-PCR和原位杂交法测定肌肉内hVEGF165基因表达,采用免疫组化和Western印迹法测定其蛋白产物的表达.结果骨骼肌细胞外源性hVEGF165基因表达量于注射后1周达到高峰,持续2~3周.蛋白表达于注射后2周达到高峰,维持至注射后4周. 结论骨骼肌细胞能摄取并表达外源性hVEGF165基因,并能进一步合成分泌hVEG165蛋白.phVEGF165肌肉直接注射的作用时间有限、范围局限,使用安全性较高.