目的 探讨细胞自噬对吉非替尼(Gefitinib)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖的影响.方法 采用Western blotting和LC3抗体检测自噬标志物LC3Ⅱ的含量,判断Gefitinib是否诱导NSCLC Calu6和H460细胞自噬.采用增强绿色荧光蛋白(EGFP)-LC3b质粒转染NSCLC细胞系Calu6和H460,再用40 μmol/L Gefitinib处理细胞48 h,观察绿色荧光蛋白(GFP)的分布情况.分别采用细胞自噬诱导剂依维莫司(Everolimus)、Gefitinib和Gefitinib联合Everolimus处理H460细胞,药物处理10 d后用结晶紫染色,显微镜下统计克隆数,计算不同药物刺激后细胞克隆形成数和药物对H460细胞的抑制率.结果 Western blotting检测显示,Gefitinib 40 μmol/L处理细胞48 h后,明显增加LC3Ⅱ的积累,绿色荧光呈散点状分布.经Everolimus、Gefitinib和Gefitinib联合Everolimus处理后,H460细胞克隆形成数差异有统计学意义(P＜0.05),其中Gefitinib联合Everolimus处理对H460细胞的抑制率最强,两者之间有协同作用.结论 Gefitinib能够诱导NSCLC细胞自噬,并且增加细胞自噬能增强Gefitinib对肺癌细胞增殖的抑制率.
作者：徐志红；高蓓莉；胡家安
来源：上海交通大学学报（医学版） 2013 年 33卷 1期
