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目的·研究微小RNA-143(miR-143)在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测.方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞.实时荧光定量PCR检测人结肠癌、癌周正常组织、慢病毒感染后HCT116和RKO细胞中miR-143的表达.Annexin V-APC单染法及流式细胞仪检测感染前后细胞凋亡能力.Transwell法检测感染前后HCT116、RKO细胞迁移能力的改变.Western blotting方法检测FOSL2蛋白的表达.结果·miR-143在结肠癌组织中的表达量显著低于癌周正常组织(0.339±0.454 vs 1.003±0.003)(U=16.000,Z=-4.231,P=0.000).上调miR-143后,HCT116细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000),RKO细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000).上调miR-143后,HCT116迁移细胞数显著低于阴性对照组(P=0.000).miR-143下调后,RKO迁移细胞数显著高于阴性对照组(P=0.003).miR-143下调后,FOSL2蛋白表达量升高.结论·miR-143在结肠癌组织中表达量显著下降.上调miR-143可促进结肠癌细胞凋亡,并抑制HCT116细胞迁移;下调miR-143可促进RKO细胞迁移;抑制miR-143功能可上调FOSL2蛋白表达.

作者:张晓云;王立峰

来源:上海交通大学学报(医学版) 2017 年 37卷 3期

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作者:
张晓云;王立峰
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2017 年 37卷 3期
标签:
结肠癌 微小RNA-143 凋亡 迁移 FOSL2 colon cancer miR-143 apoptosis migration FOSL2
目的·研究微小RNA-143(miR-143)在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测.方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞.实时荧光定量PCR检测人结肠癌、癌周正常组织、慢病毒感染后HCT116和RKO细胞中miR-143的表达.Annexin V-APC单染法及流式细胞仪检测感染前后细胞凋亡能力.Transwell法检测感染前后HCT116、RKO细胞迁移能力的改变.Western blotting方法检测FOSL2蛋白的表达.结果·miR-143在结肠癌组织中的表达量显著低于癌周正常组织(0.339±0.454 vs 1.003±0.003)(U=16.000,Z=-4.231,P=0.000).上调miR-143后,HCT116细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000),RKO细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000).上调miR-143后,HCT116迁移细胞数显著低于阴性对照组(P=0.000).miR-143下调后,RKO迁移细胞数显著高于阴性对照组(P=0.003).miR-143下调后,FOSL2蛋白表达量升高.结论·miR-143在结肠癌组织中表达量显著下降.上调miR-143可促进结肠癌细胞凋亡,并抑制HCT116细胞迁移;下调miR-143可促进RKO细胞迁移;抑制miR-143功能可上调FOSL2蛋白表达.