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目的·探究多肽PDSORBS2对缺氧/复氧(hypoxia/heoxygenation,H/R)诱导的H9C2细胞凋亡的抑制作用以及作用机制.方法·在前期的工作中,从缺血后的大鼠心肌细胞中发现了1种新型肽PDSORBS2 (LPASLNS).采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞的活性,以选择合适浓度的多肽和H/R处理的合适时间.随机将细胞分成正常对照组(NC组)、NC+PDSORBS2组、H/R组和H/R+PDSORBS2组,使用荧光显微镜观察细胞核形态的变化,利用流式细胞术分析细胞凋亡的程度和细胞周期,使用试剂盒检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)技术检测H9C2细胞中细胞凋亡相关蛋白聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、cleaved-caspase3、B淋巴细胞瘤2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL2-associated X(Bax)蛋白以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、蛋白激酶B(protein kinaseB,AKT)、周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinases 2,CDK2)、p27Kipl蛋白的表达水平.结果·与NC组相比,缺氧6h-复氧2h的处理明显使H9C2细胞活性下降,而50 μmol/L的PDSORBS2显著增加了H/R诱导的H9C2细胞活性(P=0.004).与H/R组相比,PDSORBS2的干预改

作者:陈露露;徐勋龙;陈婉岚;邱朝晖

来源:上海交通大学学报(医学版) 2021 年 41卷 11期

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作者:
陈露露;徐勋龙;陈婉岚;邱朝晖
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2021 年 41卷 11期
标签:
多肽PDSORBS2;缺氧/复氧;凋亡;H9C2细胞
目的·探究多肽PDSORBS2对缺氧/复氧(hypoxia/heoxygenation,H/R)诱导的H9C2细胞凋亡的抑制作用以及作用机制.方法·在前期的工作中,从缺血后的大鼠心肌细胞中发现了1种新型肽PDSORBS2 (LPASLNS).采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞的活性,以选择合适浓度的多肽和H/R处理的合适时间.随机将细胞分成正常对照组(NC组)、NC+PDSORBS2组、H/R组和H/R+PDSORBS2组,使用荧光显微镜观察细胞核形态的变化,利用流式细胞术分析细胞凋亡的程度和细胞周期,使用试剂盒检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)技术检测H9C2细胞中细胞凋亡相关蛋白聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、cleaved-caspase3、B淋巴细胞瘤2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL2-associated X(Bax)蛋白以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、蛋白激酶B(protein kinaseB,AKT)、周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinases 2,CDK2)、p27Kipl蛋白的表达水平.结果·与NC组相比,缺氧6h-复氧2h的处理明显使H9C2细胞活性下降,而50 μmol/L的PDSORBS2显著增加了H/R诱导的H9C2细胞活性(P=0.004).与H/R组相比,PDSORBS2的干预改