采用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠肝组织总RNA中扩增到长约500 bp的小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)分子N端基因片段,将其克隆入pUCm-T载体构建重组质粒pmGN,DNA测序表明该基因片段长530 bp,序列与GenBank中的完全一致.应用PCR技术,从重组质粒pmGN中扩增目的基因片段,插入表达质粒pET-28a构建重组表达载体pET-GN,导入大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白,表达产物以Ni+-NTA agarose层析柱纯化.SDS-PAGE和Westem blot分析发现,表达产物主要以包涵体形武存在,相对分子质量约29 000.ELISA表明,重组蛋白能被抗mPGRP-L分子N端单表位多克隆抗体所识别.为mPGRP-L分子的研究奠定了一定基础.
作者：何智；陈政良
来源：现代免疫学 2005 年 25卷 5期
