目的 观察RNA干扰下调人类端粒酶反转录酶(hTERT)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 针对hTERT基因设计两对siRNA片段,瞬时转染人宫颈癌HeLa细胞;采用RT-PCR、Western印迹法检测转染后HeLa细胞hTERT在mRNA水平和蛋白水平的表达变化;PCR-TRAP法检测细胞端粒酶活性;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;transwell实验检测细胞运动侵袭能力.结果 RT-PCR及Western印迹法结果显示,hTERT-siRNA能有效下调hTERT在mRNA和蛋白水平的表达,抑制效率分别为(85.8±3.26)％、(97.5±3.72)％;RNA干扰下调hTERT基因表达后,HeLa细胞端粒酶活性抑制效率为75.5％,增殖受到明显抑制(P＜0.05);流式细胞仪检测结果显示,处于Go/G1期细胞增多,由(58.18±3.76)％上升到(68.97±4.01)％(P＜0.05);未处理组细胞凋亡(4.14±0.79)％,hTERT-si-RNA组细胞凋亡(8.1±1.22)％,细胞凋亡率增加(P＜0.05).transwell实验检测结果显示,细胞运动侵袭能力下降约30％ (P ＜0.05).结论 hTERT-siRNA可有效下调hTERT在人宫颈癌HeLa细胞中的表达,抑制HeLa细胞生长并降低其侵袭能力.
作者：陆杲川；林晓；施慧静；包姿萍
来源：同济大学学报（医学版） 2014 年 35卷 5期
