目的 利用慢病毒转染系统构建Cav 1.2基因沉默的大鼠根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs),探讨Cav 1.2在大鼠牙乳头干细胞成牙向分化中的作用.方法 取3周龄SD大鼠,采用酶消化法获取大鼠根尖牙乳头干细胞,取第二代大鼠根尖牙乳头干细胞进行克隆平板实验鉴定其增值能力;采用慢病毒转染的方法构建Cav 1.2基因沉默Sh-Cav 1.2牙乳头干细胞及对照组Luc-Cav 1.2牙乳头干细胞,RT-PCR及Western印迹法鉴定其转染效率,并诱导其向成牙本质细胞样细胞分化;在成牙向诱导分化第10天,RT-PCR及茜素红S染色观察Cav 1.2对大鼠根尖牙乳头干细胞成牙向分化的影响.结果 分离获得较强增殖能力的大鼠牙乳头干细胞,其中每200个细胞可形成6～10个克隆;荧光倒置显微镜下转染48 h,Sh-Cav 1.2及Luc-Cav 1.2均呈现绿色荧光,转染效率均达到90％;在两组细胞成牙向诱导过程中,实验组Sh-Cav 1.2牙乳头干细胞成牙相关基因DSPP的表达及钙化结节的形成均明显低于对照组Luc-Cav 1.2.结论 L型钙离子通道Cav 1.2对大鼠根尖牙乳头干细胞成牙向分化有重要作用.
作者：高倩倩；葛剑平；琚燕琴；高健；吴美生；赵守亮
来源：同济大学学报（医学版） 2015 年 36卷 2期
