目的在我们前期研究发现脱乙酰壳多糖(chitosan)包裹质粒DNA形成的chitosan-pcDNA3-VP1疫苗基因免疫诱生较高水平特异性免疫应答的基础上,探讨该疫苗诱导T辅助细胞(Th)应答的类型,为chitosan-DNA新型疫苗的分子设计奠定基础.方法以chitosan-pcDNA3-VP1、pcDNA3-VP1和pcDNA3分别滴鼻免疫BALB/c小鼠,以ELISA法检测VP1体外表达和IgG亚型;以3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖反应;并通过RT-PCR检测了小鼠心肌内细胞因子表达情况.结果 chitosan-pcDNA3-VP1体外转染后VP1的表达水平与pcDNA3-VP1转染组无显著差异(P＞0.05),表明chitosan的加入不改变pcDNA3-VP1质粒在体外细胞内的表达;chitosan-pcDNA3-VP1组脾淋巴细胞和肠系膜淋巴细胞增殖指数分别达3.0和2.74,均显著高于pcDNA3-VP1组和pcDNA3组(P＜0.01);chitosan-pcDNA3-VP1免疫可显著增强IgG2a的生成,第6周和第12周IgG2a/IgG1比值分别为2.26和44.2,而pdDNA3-VP1组IgG2a表达稍高于IgG1、IgG2b和IgG3表达,IgG2a/IgG1比值为1.63(P＜0.05);细胞因子检测表明chitosan-pcDNA3-VP1组IFN-γ表达显著高于IL-4,相对定量后IFN-γ/IL-4比值为2.1;而pcDNA3-VP1、pcDNA3组分别为1.25和0.78.结论chitosan-pcDNA3-VP1基因疫苗经滴鼻免疫可诱导Th1型免疫应答.

作者：徐薇；吴蓉；沈燕；储以微；熊思东

来源：复旦学报(医学版) 2003 年 30卷 5期