目的观察改变胞内MnSOD基因表达水平对SGC7901胃癌细胞增殖的影响.方法采用电穿孔方法将反义和正义MnSOD cDNA真核表达载体pHβA-SOD(-)pHβA-SOD(+)转染SGC7901胃癌细胞,400 mg/LG418筛选稳定表达克隆并用RT-PCR及Western杂交法鉴定后扩大培养.用pHβA空质粒转染作为对照.放射免疫法检测正义、反义及空载SGC7901胃癌细胞株内的铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD,SOD1)蛋白含量.分别用直接细胞计数法、四唑蓝(MTT)比色法、平皿克隆形成率试验及裸鼠移植瘤模型测定3组细胞在体外、体内的增殖活性.结果与空载组(Vectox-7901)相比,转染正义质粒的MnSOD-7901胃癌细胞呈现抑增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度减慢;(2)在平皿上的集落形成能力下降;(3)在裸鼠体内的成瘤性明显受抑制.转染反义质粒的MnSOD-AS7901胃癌细胞则出现促增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度加快;(2)在平皿上的集落形成率上升;(3)裸鼠移植瘤生长加速.结论通过基因转染提高胞内MnSOD的表达可抑制胃癌细胞的增殖,MnSOD可能是胃癌基因治疗的一个新靶点.
作者:陈坚;林庚金;唐峰;朱虹光;钱立平;程建;刘珊林
来源:复旦学报(医学版) 2004 年 31卷 1期