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目的观察不同剂量粉防己碱对静止期大鼠肝星状细胞(HSC)活化的影响,以及该作用与转化生长因子-β(TGF-β)信号转导的关系.方法采用胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离正常大鼠HSC,培养48h后并给予不同浓度粉防己碱(0.25、0.5、1.0、2.0 mg/L)处理.观察HSC形态学变化.采用免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达并进行图像分析;放射免疫法检测上清层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ);逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad 7 mRNA表达;Western blot法检测给予粉防己碱1.0mg/L处理的Smad 7表达.结果粉防己碱0.25~2.0 mg/L能抑制体外培养静止期HSC形态向成纤维细胞样转化;降低α-SMA、LN和PCⅢ表达;RT-PCR显示粉防己碱抑制HSC TGF-β1 mRNA表达,抑制率最高达87.85

作者:陈源文;吴建新;陈颖伟;董国芳;李定国;陆汉明

来源:上海医学 2005 年 28卷 11期

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作者:
陈源文;吴建新;陈颖伟;董国芳;李定国;陆汉明
来源:
上海医学 2005 年 28卷 11期
标签:
粉防己碱 肝星状细胞 转化生长因子-β Smad7 肝纤维化
目的观察不同剂量粉防己碱对静止期大鼠肝星状细胞(HSC)活化的影响,以及该作用与转化生长因子-β(TGF-β)信号转导的关系.方法采用胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离正常大鼠HSC,培养48h后并给予不同浓度粉防己碱(0.25、0.5、1.0、2.0 mg/L)处理.观察HSC形态学变化.采用免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达并进行图像分析;放射免疫法检测上清层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ);逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad 7 mRNA表达;Western blot法检测给予粉防己碱1.0mg/L处理的Smad 7表达.结果粉防己碱0.25~2.0 mg/L能抑制体外培养静止期HSC形态向成纤维细胞样转化;降低α-SMA、LN和PCⅢ表达;RT-PCR显示粉防己碱抑制HSC TGF-β1 mRNA表达,抑制率最高达87.85