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目的 研究RNA干扰效应对胶质瘤C6细胞株胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达的抑制作用及其对C6细胞凋亡诱导的作用.方法 体外化学合成靶向IGF-1基因的小干扰RNA(siRNA),采用脂质体法将siRNA以不同浓度梯度转染C6细胞株,设非特异的siRNA阳性对照组和未转染siRNA的阴性对照组;同时使用绿色荧光素标记的siRNA异硫氰酸荧光素(FITC)-siRNA转染细胞,于荧光显微镜下观察siRNA转染效率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测siRNA对IGF-1基因表达的抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用.结果 荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见到细胞内清晰的绿色荧光,脂质体Oligo-fectamineTM 2000的转染效率可>95

作者:王元元;董万利;胡锦

来源:上海医学 2006 年 29卷 8期

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作者:
王元元;董万利;胡锦
来源:
上海医学 2006 年 29卷 8期
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小干扰RNA 胰岛素样生长因子-1 胶质瘤 转染效率
目的 研究RNA干扰效应对胶质瘤C6细胞株胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达的抑制作用及其对C6细胞凋亡诱导的作用.方法 体外化学合成靶向IGF-1基因的小干扰RNA(siRNA),采用脂质体法将siRNA以不同浓度梯度转染C6细胞株,设非特异的siRNA阳性对照组和未转染siRNA的阴性对照组;同时使用绿色荧光素标记的siRNA异硫氰酸荧光素(FITC)-siRNA转染细胞,于荧光显微镜下观察siRNA转染效率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测siRNA对IGF-1基因表达的抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用.结果 荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见到细胞内清晰的绿色荧光,脂质体Oligo-fectamineTM 2000的转染效率可>95