氨基末端B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体的构建及纯化-临床诊疗知识库

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作者：

李卫鹏；郑佐娅；王红；王从珠；杭勤；赵卫国

来源：

检验医学 2005 年 20卷 5期

标签：

氨基末端B型钠尿肽克隆构建纯化

目的克隆人氨基末端B型钠尿肽(NT-proBNP)基因,构建原核表达载体并纯化其表达蛋白.方法用聚合酶链反应(PCR)从正常成人cDNA库中扩增出人NT-proBNP基因,将其克隆进pUCm-T中测定核苷酸序列.构建大肠杆菌分泌性表达载体pGEX-4T-3-NT-proBNP,IPTG诱导表达,GSH-agarose亲和纯化该表达蛋白.结果经PCR扩增成功获得228 bp的NT-proBNP基因,测序正确,在大肠埃希菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的23

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