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目的:建立液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清25-羟基维生素D2[25(OH)D2]及25-羟基维生素D3[25(OH)D3]含量的方法。方法采用乙醇沉淀蛋白,正己烷液液萃取目标组分,乙腈复溶。采用LC-MS/MS[正离子电喷雾离子化(ESI+)的多反应监测模式(MRM)]氘代同位素内标法检测血清25(OH)D2及25(OH)D3含量并进行相关方法学验证。结果 LC-MS/MS检测血清25(OH)D2及25(OH)D3的批内精密度为0.88%~7.69%,批间精密度为1.56%~9.90%;25(OH)D2在0.5~10.0 ng/mL、25(OH)D3在5~100 ng/mL范围内线性良好,线性相关系数分别为0.9991、0.9999,校准品测试结果正确度为95.5%~101.2%。281名志愿者男、女之间25(OH)D2含量差异无统计学意义(P>0.05),25(OH)D3含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LC-MS/MS检测血清25(OH)D2及25(OH)D3的敏感性高,结果准确、稳定,可应用于临床分析。

作者:徐凤仙;于嘉屏

来源:检验医学 2015 年 8期

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作者:
徐凤仙;于嘉屏
来源:
检验医学 2015 年 8期
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25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3 液相色谱串联质谱 内标法 血清 25-hydroxyvitamin D2 25-hydroxyvitamin D3 Liquid chromatography tandem-mass spectrometry Internal standard method Serum
目的:建立液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清25-羟基维生素D2[25(OH)D2]及25-羟基维生素D3[25(OH)D3]含量的方法。方法采用乙醇沉淀蛋白,正己烷液液萃取目标组分,乙腈复溶。采用LC-MS/MS[正离子电喷雾离子化(ESI+)的多反应监测模式(MRM)]氘代同位素内标法检测血清25(OH)D2及25(OH)D3含量并进行相关方法学验证。结果 LC-MS/MS检测血清25(OH)D2及25(OH)D3的批内精密度为0.88%~7.69%,批间精密度为1.56%~9.90%;25(OH)D2在0.5~10.0 ng/mL、25(OH)D3在5~100 ng/mL范围内线性良好,线性相关系数分别为0.9991、0.9999,校准品测试结果正确度为95.5%~101.2%。281名志愿者男、女之间25(OH)D2含量差异无统计学意义(P>0.05),25(OH)D3含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LC-MS/MS检测血清25(OH)D2及25(OH)D3的敏感性高,结果准确、稳定,可应用于临床分析。