制备用地高辛标记的神经生长因子(NGF)的RNA探针并用其研究NGF在海马组织中的表达.设计NGF引物,构建NGF/pGEM-T重组质粒,分别用ApaⅠ和Sac Ⅰ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig-)正、反义RNA探针.运用点膜杂交的方法检测探针的敏感度;运用该探针的原位杂交法分析NGF在海马中的表达.本研究成功地构建了NGF/pGEM-T质粒,获得了正、反义dig-NGF RNA探针,并应用该探针在海马中观察到NGF mRNA的表达.本研究的结果为深入探讨NGF在海马发育和损伤过程中的表达奠定了基础.
作者:沈宓;丁斐
来源:神经解剖学杂志 2005 年 21卷 4期