目的:建立体外血脑屏障模型(blood-brain barrier model,BBBM),观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) A549细胞对BBBM功能的影响.方法:早上将周细胞(pericytes,PC)接种到Transwell膜的外侧面,星形胶质细胞(astrocytes,AS)接种到12孔板内,8h后将Transwell置入12孔板内,再将小鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)接种到transwell膜的内侧面,建立血脑屏障模型.模型建立后每天进行试漏试验及跨内皮电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)测定,鉴定是否成模.成模后分为对照组与实验组,将A549细胞接种到实验组BBBM内室,共培养体系置于培养箱,于24 h、48 h、72 h后进行电阻测定及辣根过氧化物酶渗透试验,以评估BBBM的功能.分别于渗透试验进行至2h、6h时取样,根据样本中辣根过氧化物酶浓度计算表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp).结果:(1)部分血脑屏障模型在建立后3d成模,4d可全部成模.(2) A549细胞加入BBBM内室共培养.(a)实验组TEER值与对照组比较:1d后无显著变化(P>0.05);2 d后降低出现统计学差异(P<0.05);3d后降低具有统计学差异(P<0.01);(b)渗透试验与对照组比较:1d后2h及6h渗透试验实验组Papp均降低,但无统计学差异(P >0.05
作者:王家雄;徐显鑫;康志文;邱金涛;俞泽然;许金明;龙江
来源:神经解剖学杂志 2017 年 33卷 2期