目的:研究加参方对转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨.方法:出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分离心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblasts,CFs).采用10 ng·mL-1浓度的TGF-β1诱导CFs,0.25 mg·mL-1浓度的加参方药液作用于CFs 24 h.采用CCK-8计数法检测加参方对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光法检测加参方对CFs α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)及Ⅰ型胶原的影响;羟脯氨酸测定法检测加参方对CFs胶原分泌的影响;实时荧光定量PCR(Real Time-PCR,RT-PCR)检测加参方对CFs Smad2、Smad3 mRNA表达的影响;蛋白印迹法(Western blot)检测加参方对CFs磷酸化Smad2、磷酸化Smad3(Phosphorylated-Smad2/3,P-Smad2/3)蛋白表达的影响.结果:与模型组相比,加参方可明显抑制CFs的细胞增殖(P<0.05),降低α-SMA及Ⅰ型胶原的表达量(P<0.05),减少CFs的胶原分泌(P<0.05).同时,加参方组Smad2、Smad3 mRNA较模型组明显下调(P<0.05),P-Smad2、P-Smad3蛋白表达量也明显下降(P<0.05).结论:加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及向肌成纤维细胞的分化具有
作者:于瑞;崔琳;王幼平;李彬;王新陆;谢世阳;高原;朱明军
来源:世界科学技术-中医药现代化 2015 年 11期