自杀基因治疗是恶性肿瘤基因治疗中最常用的途径之一.以逆转录病毒载体--pRevTRE为基础进行载体构建,首先使用PCR技术对单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSVtk)进行扩增,将HSVtk基因插入到pRevTRE,形成重组载体pRevTRE/HSVtk,用磷酸钙共沉淀法,经过两轮转染,分别将pRevTRE/HSVtk和pRevTet-On质粒导入乳腺癌细胞株(MCF-7).经过潮霉素B(Hygromycin B)和G418筛选,建立了一株稳定的受四环素衍生物--强力霉素(Doxycycline,Dox)调控、表达HSVtk基因产物的人乳腺癌细胞株MCF/TRE/tk/Tet-On.HSVtk基因表达产物可以将无毒性的药物前体Ganciclovir (GCV)转变成一种有毒的代谢产物,从而杀死乳腺癌细胞株(MCF-7),达到基因治疗的目的.
作者：罗赛群；胡维新；易伟峰；曾赵军；陈迁
来源：生命科学研究 2002 年 6卷 2期
