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目的:观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌细胞株SW620增殖、凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位设计、合成反义寡核苷酸并通过脂质体将其转染至人结肠癌细胞SW620中.噻唑蓝(MTT)法观察survivin ASODN对SW620细胞增殖的抑制作用,测定IC50;转染36 h后,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察检测SW620细胞核变化,RT-PCR检测survivin ASODN处理后SW620细胞中caspase-3 mRNA表达,分光光度法检测caspase-3酶活性.结果:转染8h后,SW620细胞中可见黄绿色荧光均匀分布.不同浓度survivin ASODN处理SW620细胞44h后,SW620细胞增殖显著受到抑制,IC50为1×10-6 M.2×10-7,4×10-7,6×10-7,8×10-7 and 1.2×10-6 M的survivin ASODN处理后,细胞生长抑制率分别为15.38±0.022

作者:靳秋月;张东昌;史娜;谢红;陈立军

来源:现代生物医学进展 2009 年 9卷 16期

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作者:
靳秋月;张东昌;史娜;谢红;陈立军
来源:
现代生物医学进展 2009 年 9卷 16期
标签:
survivin 反义寡核苷酸 人结肠癌SW620细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3
目的:观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌细胞株SW620增殖、凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位设计、合成反义寡核苷酸并通过脂质体将其转染至人结肠癌细胞SW620中.噻唑蓝(MTT)法观察survivin ASODN对SW620细胞增殖的抑制作用,测定IC50;转染36 h后,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察检测SW620细胞核变化,RT-PCR检测survivin ASODN处理后SW620细胞中caspase-3 mRNA表达,分光光度法检测caspase-3酶活性.结果:转染8h后,SW620细胞中可见黄绿色荧光均匀分布.不同浓度survivin ASODN处理SW620细胞44h后,SW620细胞增殖显著受到抑制,IC50为1×10-6 M.2×10-7,4×10-7,6×10-7,8×10-7 and 1.2×10-6 M的survivin ASODN处理后,细胞生长抑制率分别为15.38±0.022