目的:利用骨肉瘤OS-732细胞,探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应.方法:设计合成特异性靶向survivin的ASODN,以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染,并设空白、正义(SODN)对照组进行比较.采用RT-PCR、Western blotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivin mRNA、蛋白表达状态,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化,MTT法检测细胞生长抑制情况,激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度.结果:转染ASODN各组OS-732细胞survivin mRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组;细胞凋亡率(AI)显著增加,细胞生长相应受抑,caspase-3活性显著提高;上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性;而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异.结论:ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达,激活凋亡效应蛋白酶caspase-3,在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用.
作者:高大新;张海燕;杨向红;黄涛;王岩峰;吕刚
来源:中国病理生理杂志 2006 年 22卷 3期