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目的 探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系联合Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对血管内皮细胞的特异性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV304细胞株,同时用Survivin ASODN转染同一细胞株,应用逆转录-聚合链反应(RT-PCR)和Western blot检测CDglyTK和Survivin基因的表达,观察两者联合应用对细胞株的杀伤效应和旁观者效应.结果 Survivin ASODN可转染重组腺病毒感染的细胞,并对两者的转染及感染效率无明显影响,CDglyTK可在ECV304细胞株高效表达,Survivin ASODN可明显降低Survivin蛋白表达.单独导入IC50的Survivin ASODN基因,细胞存活率为(55.90±3.61)

作者:姚航;黄宗海;厉周;苏国强;贺蓉;崔大祥

来源:中华实验外科杂志 2006 年 23卷 12期

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作者:
姚航;黄宗海;厉周;苏国强;贺蓉;崔大祥
来源:
中华实验外科杂志 2006 年 23卷 12期
标签:
血管内皮细胞 基因治疗 Survivin 寡核苷酸类,反义 双自杀基因
目的 探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系联合Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对血管内皮细胞的特异性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV304细胞株,同时用Survivin ASODN转染同一细胞株,应用逆转录-聚合链反应(RT-PCR)和Western blot检测CDglyTK和Survivin基因的表达,观察两者联合应用对细胞株的杀伤效应和旁观者效应.结果 Survivin ASODN可转染重组腺病毒感染的细胞,并对两者的转染及感染效率无明显影响,CDglyTK可在ECV304细胞株高效表达,Survivin ASODN可明显降低Survivin蛋白表达.单独导入IC50的Survivin ASODN基因,细胞存活率为(55.90±3.61)