目的 评价聚酰胺-胺型树枝状高聚物(PAMAM-dendrimer,PAMAM-D)作为靶向表皮生长因子受体(EGFR)的荧光标记反义寡核苷酸(ASODN)转染人脑恶性胶质瘤体外细胞系U251的可行性及优化方案.方法 应用电泳结合实验筛选PAMAM-D与反义EGFR寡核苷酸最佳结合N/P比值,通过荧光显微镜动态观察、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)评价PAMAM-D转染相同剂量ASODN至人脑恶性胶质瘤体外细胞系U251的效果,噻唑蓝(MTT)染色法间接反映各转染试剂的细胞毒性.结果 (1)电泳结合实验显示电荷比(N/P)大于16:1时ODN才能与PAMAM完全结合.(2)动态荧光显微镜观察发现PAMAM-D-ASODN呈颗粒状分布在细胞质内,而oligofectamin-ASODN形态均匀.(3)RT-PCR结果显示PAMAM-D和oligofectamin介导的靶向EGFR的ASODN转染的U251细胞的EGFR表达明显下调;MTT法分析证明PAMAM的细胞毒性与oligofectamin的基本相当(P＞0.05),PAMAM-D-ODN的毒性随电荷比的增大而增大.结论 PAMAMD可以作为寡聚核苷酸的投递载体成功转染人脑胶质瘤细胞.
作者：李菲；康春生；原续波；浦佩玉；王广秀；盛京
来源：中华实验外科杂志 2007 年 24卷 2期
