目的:观察饥饿及雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J中自噬基因LC3及beclin-1表达的变化,初步探讨吞噬(autophagy)在急性胰腺炎中的作用.方法:选择体外培养的生长状态良好的大鼠胰腺腺泡AR42J细胞,随机分为3组,饥饿组(N=10),雨蛙素处理组(N=10),空白对照组(N=10).饥饿组加入充足的平衡盐溶液,雨蛙素处理组加入含10-7mol/L雨蛙素的全营养培养液,空白对照组加入含20%灭活胎牛血清的F12-K培养液(pH7.2-7.4),各组分别于处理后2、4、6h收集细胞并提取蛋白质.采用免疫印迹法检测三组不同时点胰腺腺泡细胞AR42J中自噬基因Beclin-1和LC3的蛋白表达.结果:空白对照组不同时点beclin-1和LC3-Ⅱ均呈低表达,且各时点比较差异无统计学意义(P<0.05).饥饿组和雨蛙素处理组beclin-1和LC3-Ⅱ的表达随处理时间的延长逐渐增加,且不同时点beclin-1和LC3-Ⅱ的表达均较空白对照组显著增高,差异均具统计学意义(P<0.05).结论:雨蛙素和饥饿刺激可导致大鼠胰腺腺泡细胞AR42J中LC3-Ⅱ及beclin-1蛋白表达随作用时间的延长而增加,自噬可能参与了胰腺炎的发生发展过程.
作者:张伟辉;乔昕;吕航;马文超;王端平;高博;孙旺
来源:现代生物医学进展 2015 年 15卷 8期