目的:探讨E1A激活基因阻遏子(Cellular repressor ofE1 A-stimulated genes,CREG)在氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)引起的人血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖中的作用及可能机制.方法:用60μg/mL ox-LDL处理人胸主动脉VSMC,在不同时间点(0h,12h,24 h,48 h)计数细胞并绘制生长曲线;在48 h时间点进行BrdU染色检测增殖细胞的比率;采用Western Blot检测各时间点CREG表达.通过向VSMC中转染携带CREG基因的质粒载体,筛选获得过表达CREG的VSMC(VSMCCREG).进一步用ox-LDL处理VSMCCREG,采用前述方法绘制生长曲线、进行48 h时间点BrdU染色并检测CREG和磷酸化Erk1/2的表达.结果:与未经处理的对照组VSMC相比,ox-LDL处理的VMSC细胞总数及BrdU阳性细胞比率显著增加;并且,CREG表达随处理时间延长逐渐降低.此外,与ox-LDL处理的VSMC组相比,ox-LDL处理的VSMCCREG组细胞总数及BrdU阳性细胞比率均显著下降;并且CREG表达增加、磷酸化Erk1/2水平下降.结论:过表达CREG可能通过降低Erk1/2磷酸化抑制ox-LDL诱导的人VSMC增殖.
作者:杨桂棠;韩雅玲;闫承慧;田孝祥;李洋
来源:现代生物医学进展 2015 年 15卷 36期