目的:建立佛波酯(PMA)诱导人中性粒细胞NETS形成的方法,并研究NETS的结构组成方法:提取人中性粒细胞,使用10、30、90 nM的PMA分别刺激细胞2、3、4h,采用核酸染料sytox green染色后,通过共聚焦显微镜检测和比较各组NETS的形成情况,并通过活性氧(ROS)探针对NETS进行荧光染色,对弹性蛋白酶(Elastase)、髓过氧化物酶(MPO)和组蛋白H3(Histone H3)进行免疫荧光染色.结果:PMA低于30 nM刺激细胞4h都不会产生NETS,90 nM刺激3h就会形成NETS,使用90 nM刺激中性粒细胞4h后,其形成的NETS含量最高,显著高于30 nM刺激4h及90 nM刺激3h(P＜0.05)免疫荧光染色结果显示NETS结构上含有大量ROS和Elastase,含有少量MPO,几乎不含Histone H3.结论:90 nM PMA刺激中性粒细胞4h可促进NETS形成,其含有大量ROS和Elastase.
作者：祝元锋；陈晓丽；鲁永玲；范士郡；刘鑫
来源：现代生物医学进展 2016 年 16卷 9期
