目的:HIF-1α是由低氧诱导表达的一个重要的调节肿瘤生长、代谢的转录因子,它的降解除了通过泛素-蛋白酶体途径降解之外还与可以通过细胞自噬途径降解.通过研究miR-147a对细胞自噬的影响从而进一步研究miR-147a对HIF-1α降解的影响.方法:在HeLa细胞中过表达miR-147a,用Western blot和Q-PCR检测细胞自噬相关的标志物LC3B、P62、LAMP-2A的变化.再通过溶酶体-自噬泡共定位实验共聚焦显微镜观察自噬泡的数量以及共定位情况.最后通过加入自噬诱导剂(EBSS)和自噬抑制剂(BafilomycinA1),用Western blot检测转染NC与miR-147a后HIF-1α蛋白的表达情况.结果:过表达miR-147a后自噬相关的标志物LC3B、P62表达量上升,LAMP-2A表达量下降,且溶酶体与自噬泡的共定位增多;加入自噬诱导剂和自噬抑制剂后HIF-1α蛋白的表达量增加.结果表明miR-147a可以抑制细胞自噬的巨自噬途径以及分子伴侣介导的自噬途径,积累HIF-1α蛋白.结论:miR-147a通过抑制细胞自噬从而减少HIF-1α蛋白的降解,但是miR-147a作用靶点的分子机制需要进一步研究.
作者：王凡；卢锦华；何杰；张浩翔；张雅鸥
来源：现代生物医学进展 2017 年 17卷 2期
