目的:探讨小檗碱对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所致人肝癌细胞株HepG2胰岛素抵抗的缓解作用及分子机制.方法:采用10ng/mL TNF-α诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗,同时以1 μmol/L小檗碱处理细胞,通过Western blotting检测胰岛素通路信号分子(IRS1、AKT)和TNF-α通路信号分子(Traf2、MEKK1、MEK1/2、ERK1/2)的蛋白表达.此外,通过过表达或抑制TNF-α通路的信号分子(MEK1、ERK2)进一步探讨小檗碱靶点.结果:TNF-α抑制HepG2细胞AKT(Thr308、Ser473位点)和IRS1(酪氨酸位点)的磷酸化(＜0.05),促进IRS1 (Ser307位点)和ERK1/2的磷酸化(P＜0.05),而这一作用能够被小檗碱所逆转(P＜0.05).同时,TNF-α对AKT活性的抑制作用能够被ERK1/2或MEK1/2的抑制剂拮抗(P＜0.05).此外,小檗碱并不能改善持续激活型ERK2 (CA)或MEK1 (CA)对胰岛素通路的抑制作用(P＞0.05),但是能阻碍Traf2与MEKK1的相互作用(P＜0.05).结论:小檗碱通过抑制Traf2-MEKK1-MEK-ERK通路改善TNT-α诱导的胰岛素抵抗.
作者：年雪；王小丽；于东升；胡巧云；张佳；唐传峰；刘培玉；盛亮
来源：现代生物医学进展 2017 年 17卷 36期
