目的:探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)对三阴性乳腺癌对多西他赛敏感性的影响,为三阴性乳腺癌的治疗提供新的思路.方法:通过包装慢病毒构建PRMT5过表达稳转细胞系和PRMT5敲除细胞系.采用平板克隆测定不同浓度下多西他赛对于MDA-MB-231细胞和PRMT5过表达细胞增殖的影响.采用流式周期和凋亡检测不同浓度多西他赛对PRMT5过表达和PRMT5敲除以及MDA-MB-231亲本细胞的周期以及凋亡的影响.采用Western Blot方法检测PARP以及p21、p27及LC3等表达.结果:成功构建PRMT5过表达及敲除稳转系.与对应对照组(MDA-MB-231细胞)比较,4nM和8nM的多西他赛处理的PRMT5过表达细胞系(MDA-MB-231-PRMT5细胞)形成克隆率明显降低(P＜0.05),细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),细胞周期p21分子表达增多(P＜0.05),但未随浓度增加增高(P＜0.05),cyclingD1、PARP剪切体、LC3-Ⅱ的表达均明显增加(P＜0.05).4nM和8nM的多西他赛处理的PRMT5敲除稳转系(MDA-MB-231-shPRMT5)细胞凋亡率、p21、p27、cyclinD1、LC3-Ⅱ的表达均较对应对照组(MDA-MB-231细胞)明显降低(P＜0.05),LC3-Ⅱ表达水平较亲本低(P＜0.05).结论:PRMT5高表达可增加MDA-MB-231细胞对多西他赛的敏感性,PRMT5有望成为多西他赛临床治疗敏感性

作者：孔静；王哲；杨云舒；吴颖；凌瑞

来源：现代生物医学进展 2018 年 18卷 6期